Taca de Gram: com es fa i per a què serveix

Content

• Com es fa la tinció de Gram
• Per a què serveix

La tinció de Gram, o simplement Gram, és una tècnica ràpida i senzilla que té com a objectiu diferenciar els bacteris segons les característiques de la seva paret cel·lular després de l’exposició a diferents colorants i solucions.

Així, mitjançant la tinció de Gram, és possible comprovar, a més de la forma dels bacteris, el color que adquireixen, i aquest resultat és important per definir altres estratègies per identificar les espècies bacterianes i per al metge indicar un tractament preventiu. segons les característiques observades microscòpicament.

La tinció de Gram es fa habitualment de forma rutinària al laboratori i forma part de l’examen de bacterioscòpia. Comprendre què és i com es fa la bacterioscòpia.

Com es fa la tinció de Gram

La tinció de Gram és un mètode ràpid, pràctic i econòmic per identificar els bacteris responsables de les infeccions, sent útil per als metges per indicar un tractament preventiu de la infecció que es pugui produir, ja que es coneixen les característiques específiques d’aquests grups de bacteris,

La tinció de Gram es fa en 7 passos principals, però el protocol pot variar en funció del laboratori:

1. Col·loqueu algunes colònies del bacteri a la diapositiva, afegint una gota d’aigua per facilitar l’homogeneïtzació de les colònies;
2. Deixeu-lo assecar una mica i la fulla pugui passar ràpidament per la flama per afavorir l’assecat, però és important prestar atenció a la temperatura, ja que si la temperatura és massa alta és possible que hi hagi un canvi en l’estructura del bacteris, que poden interferir amb el resultat de l'examen;
3. Quan el portaobjectes estigui sec, tapeu-lo amb el colorant de cristall violeta i deixeu-lo actuar durant aproximadament 1 minut;
4. Renteu el portaobjectes amb un raig d’aigua corrent i tapeu-lo amb el lugol, que té l’objectiu de fixar el colorant blau, i deixeu-lo actuar durant 1 minut. Tots dos tipus de bacteris poden absorbir el complex format pel colorant i el lugol i es tornen blaus;
5. Després, renteu el portaobjectes amb aigua corrent i apliqueu-hi un 95% d’alcohol, deixant-lo actuar durant 30 segons. L’alcohol és l’encarregat de dissoldre la membrana lipídica que forma bacteris gramnegatius i, així, eliminar el complex format entre el colorant i el lugol, descolorint aquests bacteris. No obstant això, en el cas dels bacteris gram positius, l'alcohol deshidrata la paret cel·lular dels bacteris gram positius, provocant la contracció dels porus i la impermeabilitat;
6. Després, renteu-ho de nou amb aigua corrent i tapeu el portaobjectes amb el segon colorant, la fucsina o la safranina i deixeu-lo actuar durant 30 segons;
7. Després, renteu el portaobjectes amb aigua corrent i deixeu-lo assecar a temperatura ambient.

Tan bon punt la làmina estigui seca, és possible posar una gota d’oli d’immersió i observar la làmina al microscopi amb un objectiu 100x, sent possible comprovar la presència o absència de bacteris, així com la presència de llevats i epitelis cèl · lules.

Per a què serveix

La tinció de Gram té com a objectiu principal diferenciar els bacteris segons les característiques de la paret cel·lular i la morfologia general. Així, segons les característiques observades al microscopi, els bacteris es poden classificar en:

• Bacteris gram-positius, que es visualitzen amb un color blau pel fet que l'alcohol no els descolora, ja que tenen una paret cel·lular més gruixuda i els porus es contrauen quan s'exposen al lugol;
• Bacteris gramnegatius, que es visualitzen amb un color rosa / porpra pel fet de ser descolorits per l’alcohol i tacats per safranina o fucsina.

Després de veure els bacteris al microscopi, és possible que es realitzin noves proves al laboratori per identificar les espècies de bacteris. Tanmateix, a través del Gram i l’associació amb signes i símptomes presentats per la persona, el metge pot indicar un tractament preventiu fins que no es disposa del resultat d’exàmens més específics, ja que d’aquesta manera és possible disminuir la taxa de replicació bacteriana i prevenir complicacions.